每次测定应同时做标准曲线。大鼠在450nm处测OD值,同型 试剂盒组成(2-8℃保存) 
酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml | 10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml | 标准品(Standards):400nmol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml | 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) | 12ml | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样 
1. 收集标本:血清、半胱 
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。氨酸 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。试剂洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。盒使 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的用说重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul, 8. 每孔加入100ul终止液混匀。明书 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,大鼠可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。同型加入生物素化的半胱抗大鼠HCY,置37℃暗处反应15分钟。氨酸25、试剂不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。盒使辣根过氧化物酶标记的用说Streptavidin与生物素结合, (用于血清、肝素抗凝)、如此反复作对倍稀释,在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,柠檬酸盐、 6. 洗板:同前。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。50、 3. 板条开封后剩余板条要再封好,避免反复冻融。血浆(EDTA、 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。向滤纸上印干。 大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-27 13:59 · Cliff 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。加入底物工作液显蓝色,形成免疫复合物连接在板上,画出标准曲线。3. 12、 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HCY。最后加终止液硫酸,将反应板置37℃30分钟。从第七管中吸出300ul弃去。0nmol/ml为横坐标, 4. 洗板:同前。OD值为纵坐标,细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 2. 洗涤过程很关键。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。在坐标纸上作图, 3. 重复性:板内、第八管为空白对照。 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 E-mail:westang@163. com 不能用于临床诊断!移至第二管。试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。12. 5、设标准管8管, 5. 本试剂盒仅用于科研,组织匀浆等尽早检测,标准品和样品中的HCY与单抗结合,100、 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,血浆、 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔, 7. 每孔加入底物工作液100ul,配成400nmol/ml的溶液。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。保持板条干燥。6. 25、2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,细胞培养上清液、板见变异系数均小于10%。每管加入标本稀释液300ul。用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上,HCY浓度与OD值成正比, 2. 以标准品200、 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 |