今年一月份，实没CRISPR真的那神进入黄金期了么？Science特别撰文探讨了这一技术的前景与风险。仿佛马上就能用来治疗患者了。实没欧洲已经批准了一种治疗于罕见代谢病的那神基因疗法。他们通过改造Cas9酶大大减少了它与DNA的实没非特异性互作，

世界各地的那神科学家们本周将聚集在华盛顿，这意味着我们需要寻找非病毒的实没递送途径，举例来说，那神CRISPR修补的实没基因受到天然启动子的控制，”斯坦福大学的那神Mark Kay强调。神经元、实没

CRISPR如何起作用？那神

传统基因疗法是通过无害病毒或一些其它载体将“正版”基因送入细胞，

Science长文：CRISPR其实没那么神？实没

2016-05-06 06:00 · angus

毫无疑问，经历二十多年沉浮，那神这些小鼠一辈子都在表达这种蛋白。实没Cas9完成切割任务之后细胞仍会继续生产这种蛋白。这需要相当长的时间，Editas公司计划明年启动临床实验，鉴于CRISPR等基因编辑技术的效率还远远赶不上基因导入，患者需要进行多次治疗。对于绝大多数人类疾病（比如肌营养不良和囊性纤维化）来说，今年这次会议有93份关于CRISPR的摘要（摘要总数768份），眼细胞和造血干细胞）一般都没在分裂。证明CRISPR可以帮助杜氏肌营养不良小鼠恢复一些肌肉功能。许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。蛋白质产物不会过多也不会太少。我们需要CRISPR在体内发挥治疗作用，此外，没有必要再用CRISPR从头来一遍。CRISPR还有一段很长的路要走。新兴基因编辑技术CRISPR将会成为本次会议上的热门话题，就算是特异性非常高的Cas9也可能会发生脱靶，新兴基因编辑技术CRISPR将会成为本次会议上的热门话题，因为回到体内的细胞极少能够存活。这些小鼠看起来依然很好，当然，基因导入遇到的障碍依然挡在CRISPR面前。不少人表示并不打算换用这些新技术。

CRISPR仍有很大的安全隐患

CRISPR脱靶效应常被人们挂在嘴边，

传统基因疗法面对的许多难题，机体也可能会对其产生免疫反应。基因疗法的老将们在谈到CRISPR治疗疾病的时候都相当谨慎。这种切割有可能引起癌症。就算杂交二十代，研究者们往往只能借助病毒载体把编码Cas9的DNA带入细胞。但它矫正基因的效果并没有那么好。据悉，那么，我们都希望能够关闭Cas9酶。因为CRISPR校正DNA需要通过同源介导修复（HDR），它能治疗的疾病比传统方法多得多。这一直是生物学上的老大难问题。而不是修正基因。二十年，大家总是非常激动，补偿致病的缺陷基因。CRISPR也是科研领域的吸金王。显著提高了Cas9置换单个DNA碱基的效率。还有不少研究者准备在本次ASCGT年会上公布传统基因疗法取得的喜人成绩。那么，“每当一种新技术出现的时候，

你真的需要CRISPR么？

传统的基因疗法在不少疾病领域已经走了很长一段路，不幸的是，在这种情况下，

脱靶效应并不是CRISPR唯一令人担心的问题。比如，把细胞取出来修好再放回去并不现实，

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The gene editor CRISPR won’t fully fix sick people anytime soon. Here’s why

CRISPR还存在什么问题？

用CRISPR删除基因相对来说比较容易，就看要怎样启动它们，Editas Medicine、希望用他们的基因疗法治疗Leber先天性黑朦（LCA）。” 张锋指出。在这种情况下，许多人相信CRISPR会为基因疗法注入新的活力。

CRISPR发展到了什么地步？

现在研究者们已经用CRISPR成功治疗了患有遗传性肝病和肌营养不良的动物，所有细胞都存在HDR机制，CRISPR能去除杜氏肌营养不良基因的一部分，此外，剩下的部分可以生产一种截短的功能性蛋白。

Science认为，四月份在Nature杂志发表的另一项成果，病毒载体的递送能力限制着基因编辑的效力。肌细胞、这是首次在完全发育的活体哺乳动物中用CRISPR成功治疗一种遗传疾病。直接修复细胞的基因缺陷。这一过程只在分裂中的细胞激活。然而，他的研究团队建立了携带Cas9基因的小鼠，“这种酶会持续存在十几、将脱靶效率降低至无法检测到的水平。也是CRISPR前进的障碍。这种方式减少了外源基因进入错误位点的可能，CRISPR研究者往往需要两种病毒载体将CRISPR组分送入细胞，原则上优于传统的基因疗法。不过，但实际上，当然，还有一条途径是寻找不依赖HDR的替代品。这样做的效率显然比较低。而CRISPR能用正确序列替换“坏”基因，一些团队通过小鼠实验展示，Broad 研究所的CRISPR先驱张锋（Feng Zhang）表示，去年年底三个独立研究小组在Science发表文章，目前，张锋认为这并不是什么大问题。Cas9酶有时会在靶点以外的地方进行切割，参加美国基因与细胞治疗学会(ASGCT)的年会。Intellia Therapeutics和CRISPR Therapeutics这三家公司已经拿到了数亿美元的投资。比如给细胞添加特定药物。

为什么说CRISPR还没准备好？

在安全有效的修复人类基因之前，这也是该技术最大的隐患之一。研究者们必须找到有效途径将活性CRISPR送入人体的特定组织。

不过，CRISPR的首次临床应用很可能是删除基因，

由此可见，毫无疑问，没有明显的健康问题。机体内绝大多数细胞（肝细胞、本周ASGCT年会还将出现有更多这样的临床前成果。CRISPR为基因疗法带来的真正福利在于，基因编辑的细胞会死亡，也就是说，麻省总医院的研究人员在Nature杂志上发布了改良版CRISPR技术。

CRISPR研究者们正在积极解决这一问题。美国一家公司今年也在申请批准，在提升CRISPR特异性方面研究者们动作很快。比如使用脂质体或纳米颗粒。而去年只有33份。通过切除部分缺陷基因治疗LCA。CRISPR真的进入黄金期了么？Science特别撰文探讨了这一技术的前景与风险。