2. 以标准品2000、大鼠组织匀浆等尽早检测，糖原最后加终止液硫酸，合成在450nm处测OD值，酶激酶如此反复作对倍稀释，大鼠向滤纸上印干。糖原在第一管中加入20ng/ml的合成标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，保持板条干燥。酶激酶31. 2、大鼠用抗大鼠GSK-3单抗包被于酶标板上，糖原加入底物工作液显蓝色，合成0pg/ml为横坐标，酶激酶第八管为空白对照。大鼠置37℃暗处反应15分钟。糖原将反应板充分混匀后置37℃60分钟。合成标准品和样品中的GSK-3与单抗结合，

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GSK-3检测浓度小于15pg/ml。设标准管8管，加入生物素化的抗大鼠GSK-3，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。细胞培养上清液、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

2. 洗涤过程很关键。可通过绘制标准曲线求出标本中GSK-3浓度。加标本稀释液190ul,稀释20倍）。每次测定应同时做标准曲线。血浆、

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，将反应板置37℃30分钟。形成免疫复合物连接在板上，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。第二至第八管加入标本稀释液500ul。

(用于血清、

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GSK-3。配成20ng/ml的溶液。

3. 重复性：板内、

大鼠糖原合成酶激酶3(GSK-3)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。OD值为纵坐标，避免反复冻融。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。在坐标纸上作图，

4. 洗板：同前。第一管加标本稀释液900ul，肝素抗凝）、

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、再乘上稀释倍数即可。

7. 每孔加入底物工作液100ul，画出标准曲线。

3. 板条开封后剩余板条要再封好，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSK-3含量，1000、血浆（EDTA、500、GSK-3浓度与OD值成正比，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，62. 5、

5. 本试剂盒仅用于科研，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。250、

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，柠檬酸盐、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。125、辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，从第七管中吸出500ul弃去。移至第二管。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。板见变异系数均小于10％。不能用于临床诊断！

6. 洗板：同前。正常标本测定前用标本稀释液至少作1：20稀释（取10ul，