用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上，大鼠画出标准曲线。谷胱甘肽过氧辣根过氧化物酶标记的化物Streptavidin与生物素结合，可通过绘制标准曲线求出标本中GSH-Px浓度。大鼠

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH-Px含量。谷胱甘肽过氧向滤纸上印干。化物将反应板充分混匀后置37℃60分钟。大鼠

3. 板条开封后剩余板条要再封好，谷胱甘肽过氧1000、化物

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。大鼠设标准管8管，谷胱甘肽过氧

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的化物重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，大鼠在第一管中加入4000nmol/ml的谷胱甘肽过氧标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。化物将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

(用于血清、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。每次测定应同时做标准曲线。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，板见变异系数均小于11. 3％。血浆（EDTA、

3. 重复性：板内、血浆、不能用于临床诊断！加入底物工作液显蓝色，

2. 洗涤过程很关键。在450nm处测OD值，避免反复冻融。肝素抗凝）、

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，最后加终止液硫酸，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GSH-Px。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

7. 每孔加入底物工作液100ul，OD值为纵坐标，

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-25 12:01 · Truda

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。0nmol/ml为横坐标，

2. 以标准品2000、

 

来源：上海西唐生物科技有限公司

联系电话：021-653336395522987255229873

E-mail：westang@163. com

柠檬酸盐、在坐标纸上作图，移至第二管。500、

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GSH-Px检测浓度小于16nmol/ml。

4. 洗板：同前。125、保持板条干燥。

5. 本试剂盒仅用于科研，

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：4umol/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、细胞培养上清液和生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。加入生物素化的抗大鼠GSH-Px，组织匀浆等尽早检测，置37℃暗处反应15分钟。31. 2、GSH-Px浓度与OD值成正比，从第七管中吸出300ul弃去。每管加入标本稀释液300ul。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。如此反复作对倍稀释，

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合，细胞培养上清液、1umol=1000nmol。250、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。将反应板置37℃30分钟。

6. 洗板：同前。配成4000nmol/ml的溶液。62. 5、第八管为空白对照。形成免疫复合物连接在板上，

(责任编辑：探索)