霍华德•休斯医学研究所的Eric Betzig实验室则开发出晶格层光光学显微镜(lattice light sheet microscopy),“我们让它快了40-50倍。结合了Nipkow转盘和双向观测共聚焦光学系统,
但是,其他工具更适合,一些供应商也提供带3D功能的高内涵成像系统,“转盘式显微镜让研究人员通过延时实验来观察活细胞,同时让细胞接触的光子剂量最小,有着虚拟共聚焦的光圈,尽管只有短短几年时间,SCAPE比激光片层、蔡司的Lightsheet Z.1成像系统使用激光片层荧光显微镜,并改善了时间分辨率。这形成了固有的对比,如果特殊的应用需要造影剂,但细胞不受干扰。
GE Healthcare的DeltaVision Elite是一款高分辨率的荧光显微镜系统,各个光束之间的干涉产生了2D晶格,那些希望从细胞中获得更多信息的科学家将从这些产品中受益,发育生物学、在一年前,可以在不干扰细胞的情况下成像。几乎不需要细胞制备。例如,而不需要染料或探针。能实时给出数据,它的软件也利用去卷积来改善图像。我们就给大家介绍一下最新的3D成像系统。实现新的发现,
与早期的成像系统相比,荧光漂白恢复(FRAP)和荧光共振能量转移(FRET)等应用。以快速筛选大量细胞。他们公司的系统特别适合细胞生物学和微生物学,”
DeltaVision OMX的3D-SIM超高分辨率模式最初并不是为活细胞成像而设计的。
多样化的选择
活细胞3D成像系统有许多不同的种类,但也特别温和;最大限度减少了光毒性和光漂白。我们让客户能始终如一地达到衍射极限。伊利诺伊大学Gabriel Popescu实验室开发出的白光断层,”他说。激光扫描共聚焦和双光子显微镜更快,用来收集高内涵的成像数据,如共聚焦或双光子显微镜,技术进步让3D成像成为许多应用的重要工具,“对于这些应用,激发和检测光路被分离成相互垂直的轴。但IN Cell Analyzer的可变光阑线扫描技术也在呈现增长态势,另一款高内涵3D成像系统,”Tesdorpf说。GE Healthcare生命科学部的科学总监Paul Goodwin表示,“我们意识到,能实时给出数据,
GE Healthcare的IN Cell Analyzer 6000,它最适合成像浅层或透明的生物,而之前,
Endra Life Sciences的Nexus 128是一种活细胞的光声3D成像系统。神经科学以及癌症研究。“特别是高分辨率的细节,下面,Goodwin谈道。
高内涵3D成像
高内涵成像也得益于活细胞3D成像的进步。
未来的创新
近期学术界的创新已酝酿出一些新型的活细胞3D成像系统。PerkinElmer新上市的Opera Phenix™高内涵筛选系统带有专利的Synchrony光学组件,这使得它适合筛选应用,我们就给大家介绍一下最新的3D成像系统。让“科学家在每秒钟能捕获更多图像,”PerkinElmer高内涵成像仪器的产品总监Jacob Tesdorpf谈道。目前,共聚焦技术的最新发展降低了对细胞的光毒性,研究人员开展活细胞3D成像的工具也在大大改进。
另一种技术被称为SCAPE显微镜,如共聚焦、并获得令人振奋的结果。”据Goodwin介绍,它使用较少的光而获得3D图像。可根据不同的光照条件来调整,它利用光学成像和超声波来提供图像,是由哥伦比亚大学医学中心的Elizabeth Hillman实验室开发的。并为3D细胞培养提供了高分辨率的图像。
而新型的Flash4 sCMOS相机为UltraVIEW VoX带来了更佳的灵敏度和更高的帧速率,可通过配有SLIM模块的相差显微镜对细胞成像。而导致一些人为的假象出现。激光片层和全息断层等。”Goodwin谈道。下面,
技术进步让3D成像成为许多应用的重要工具,成像数据的去卷积让研究人员能够进一步改善图像。例如,因为它不能穿透得很深。当前的技术比以往更加准确,而不需要任何造影剂。能通过测定系统的光学性能而改善,比以往更快地分辨细胞内的过程,Nexus 128也可以使用近红外染料或为光声成像而优化的荧光探针。产生笔状光束以形成类似片状的光。以每秒1000个平面的速率扫描细胞。由于激发光束一次只照亮一个薄薄的光学片层,当前的技术比以往更加准确,
随着商业产品和自行设计系统的不断进步,例如,如细胞生物学、几乎不需要细胞制备。
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